流式细胞仪检测健康儿童T淋巴细胞亚群及其绝对计数的研究
发布日期:2009-07-01 阅读:5904次 查看:[大 中 小]
1 资料与方法
1.1 一般资料 本组50例健康儿童外周血标本均来自我院体检者,男28例,女22例,年龄7个月~18周岁。
1.2 试剂 CD4FITC/CD8PE/CD3PeCy5、CD45APC及溶血素,TruCount管购自美国BD公司。
1.3 仪器 FACSVantage流式细胞仪(美国BD公司)。
1.4 方法
1.4.1 样品制备 50μl全血反相抽吸入TruCount管,加20μl荧光抗体,室温避光孵育20min;50μl溶血素及500μl蒸馏水分别与标本孵育各10min,待检。
1.4.2 流式分析 FACSVantage流式细胞仪,配置氩离子激光器及氦-氖激光器,激发波长分别为488nm和633nm。采用CellQuestPro软件分析T淋巴细胞群体百分含量及细胞绝对计数,收集测定细胞10000个。
1.4.3 统计学方法 采用均数±标准差(x±s),方差分析。
2 结果
健康儿童T淋巴细胞(CD3+细胞群体)占淋巴群体的百分率为(65.16±7.05)%,绝对计数为(2029.75±718.85)个/μl全血,辅助性T淋巴细胞(CD3+CD4+细胞群体)占淋巴群体的百分率为(38.61±6.15)%,绝对计数为(1226.00±482.44)个/μl全血,抑制性T淋巴细胞(CD3+CD8+细胞群体)占淋巴群体的百分率为(23.38±7.31)%,绝对计数为(639.30±270.77)个/μl全血,CD4/CD8比值为1.86±0.80。如表1所示。
表1 健康儿童T淋巴细胞亚群百分数值及绝对计数 (x±s)
3 讨论 儿童由于其机体发育未完全成熟,与成年人相比,其免疫系统各淋巴细胞群体在相对及绝对数值上都存在着一定的差异,因此临床儿科领域需要有不同于成年人的淋巴细胞群体的相对及绝对的正常参考值[1]。