效靶细胞混合培养后2h，镜下可看到许多淋巴细胞聚集于肿瘤细胞周围;培养12h后，肿瘤细胞变大，开始溶解;至16h时DC-LAK组大部分肿瘤细胞已溶解，只有一些成团的肿瘤细胞仍存活.DC-LAK与LAK细胞对GLC-82，A549，moser和MCF-7肿瘤细胞的杀伤率，前者为84.7%，66.9%，49.3%和56.0%，后者为43.5%，31.3%，45.0%和32.4%（Fig3）.LAK细胞对肿瘤细胞有一定的杀伤作用，经特异性肿瘤抗原冲击的DC刺激后，可明显增加LAK细胞的杀伤活性，尤其对GLC-82细胞可产生特异性高效杀伤.
    
　　 讨论

　　DC是最有效的专职抗原递呈细胞，其在分化发育过程中有两个不同的阶段.未成熟的DC存在于全身非淋巴组织中，具有很强的摄取处理抗原的能力，一旦发育为成熟的DC，捕获抗原的能力即丧失，成为能激活静息T细胞产生初次免疫应答的抗原递呈细胞.在体内，DC含量较少，所以体外大量扩增纯化DC是下一步研究的关键.研究证明骨髓或脐血CD34+ 细胞及外周血单个核细胞可作为DC的来源.GM-CSF和IL-4可诱导其前体细胞向DC分化，TNF-α和PGE2 则可促进其成熟［1-6］ .我们将外周血中的单个核细胞，经GM-CSF和IL-4联合培养，并经TNF-α和PGE2 诱导后生成大量DC，平均收获率约为10.0%，即从107 个PBMC可得106 个DC，并根据其高表达HLA-Ⅰ，HLA-Ⅱ和CD45 以及表达CD1 a和CD
83 的表型特征，结合显微镜所见细胞表面大量毛刺状突起，证实为典型的DC.

　　自Rosenberg等1985年首次报道应用LAK细胞和IL-2治疗肿瘤以来，近十几年来，国内外陆续有报道.该疗法治疗的有效率约为20.0%～35.0%，但需IL-2的剂量大，具有严重的副反应.而且，LAK细胞的治疗属于非特异性的被动免疫治疗.因此，急需寻找抗肿瘤活性高而毒副反应又小的效应细胞.   
　　我们将肿瘤抗原致敏的DC体外与同源LAK细胞共同培养，诱导产生了具有抗肿瘤活性的DC-LAK细胞.这种细胞在体外不仅具有强大的特异性杀伤作用，而且对同一组织来源的肿瘤细胞也有相对较强的杀伤效应，具有临床应用前景.其优点有:首先，DC具有刺激淋巴细胞增殖的作用，在应用时可以降低IL-2的剂量或不用IL-2，以减轻毒副作用;其次，从一次分离的PBMC中，可用其中的单核细胞培养DC，用淋巴细胞培养LAK细胞，作到合理利用各种成分，不致造成细胞的浪费，降低患者的负担.此外，我们所用的LAK细胞与常规LAK细胞不同，常规LAK细胞为PBMC加IL-2培养，但其中的效应细胞主要为淋巴细胞，PBMC去除贴壁细胞后，主要成分即为淋巴细胞，我们将其作为LAK细胞的来源，在实验中证实与常规LAK细胞无明显差异.